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兔白介素2(IL-2)ELISA试剂盒试验方法、流程
发布时间:2019-04-12   点击次数:180次
   兔白介素2(IL-2)ELISA试剂盒的使用首先应平衡至室温(20-25°C )再试验( 取出所需反应板)
  1. 加入50ul标准品、血清标本于相应反应板孔中。
  2. 每孔加入100ul酶联物,轻轻混匀30秒(重要),室温60分钟。
  3. 洗板:甩尽板内液体,用蒸馏水或者洗涤液(普通洗涤液,自配)洗涤反应板,并去除
  水滴(在厚叠吸水纸上拍干);这样反复洗涤5次。
  4. 每孔加入100ul显色液, 轻轻混匀10秒,室温20分钟。
  5. 每孔加入50ul终止液。轻轻混匀30秒;30分钟内在450nm处读OD值。
  以OD值为纵坐标,以标准品浓度为横坐标,绘制标准曲线。根据血清样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
 
  兔白介素2(IL-2)ELISA试剂盒注意事项:
  1、若显色过浅,可适当延长底物温育时。
  2、冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠混合,不要在混匀器上强烈震荡。
  3、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
  4、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
  5、标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
  6、浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
  7、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
  8、反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
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